男子400米二级运动员标准是53秒14，女子400米二级运动员标准是1分零3.14秒。这些标准是根据国家体育总局在2010年3月1起颁布实施的《运动员技术等级标准》制定的，旨在鼓励运动员刻苦训练，提高运动技术水平，规范运动员技术等级管理工作。