Km值，即米氏常数，是指酶促反应速度达到最大反应速度一半时所对应的底物浓度。Km值是酶的特征常数之一，它可以近似地反映酶与底物的亲和力大小：Km值大，表明亲和力小；Km值小，表明亲和力大。Km值在生物化学、分子生物学、基因工程、生物制药、临床医学等理论、实验和实践领域有广泛应用。同一种酶对不同底物的Km值不同，这说明同一种酶对不同底物的亲和力不同。此外，催化可逆反应的酶，对正逆两向底物的Km往往是不同的，测定这些Km值的差别以及细胞内正逆两向底物的浓度，可以大致推测该酶催化正逆两向反应的效率，这对了解酶在细胞内的主要催化方向及生理功能有重要意义。